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刘树滔 (刘树滔.) [1] (Scholars:刘树滔) | 何火聪 (何火聪.) [2] | 陈菁 (陈菁.) [3] | 傅蓉 (傅蓉.) [4] | 潘剑茹 (潘剑茹.) [5] (Scholars:潘剑茹) | 饶平凡 (饶平凡.) [6]

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目的 探讨跨膜递送短肽--TAT蛋白转导结构域(简称TAT)介导的与其融合的活性蛋白在活体的跨膜递送作用.方法 以融合蛋白GST-TAT-GFP,GST-GFP-TAT和GST-GFP为研究模型蛋白,不经过蛋白质的变性处理、直接通过向小鼠腹腔注射和皮肤涂抹这两种含TAT的融合蛋白及作为对照的融合蛋白GST-GFP,一定时间作用后取体内器官和皮肤做冷冻切片,荧光显微镜检测这些融合蛋白的跨膜递送情况;并对分别融合在C端或者N端的TAT介导GFP在活体动物体内和皮肤的跨膜递送作用进行对比.结果 腹腔注射实验结果表明,TAT可以介导不经过蛋白质的变性处理的融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT跨膜递送进入到小鼠的心脏、肝、肾、脾和肺,甚至脑组织;其中GST-GFP-TAT跨膜递送效率比GST-TAT-GFP更高.结构模拟分析提示GST-GFP-TAT与GST-TAT-GFP中的TAT的暴露情况不同可能是造成两种蛋白跨膜递送活性差异的重要因素.皮肤实验的结果则表明TAT不仅介导融合蛋白GST-TAT-GFP和GST-GFP-TAT进入小鼠表皮,而且使其进入小鼠皮肤的真皮层.结论 TAT可以跨膜递送不经过变性处理的融合蛋白进入小鼠皮肤和体内,递送效率可能与TAT的暴露程度相关;这些结果为在蛋白质疗法方面应用TAT提供了进一步的理论依据.

Keyword:

TAT蛋白转导结构域 器官 皮肤 融合蛋白 跨膜递送

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  • [ 1 ] [刘树滔]福州大学
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  • [ 6 ] [饶平凡]福州大学

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Source :

中国实验动物学报

ISSN: 1005-4847

CN: 11-2986/Q

Year: 2010

Issue: 6

Volume: 18

Page: 463-466,后插3-后插4

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