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谢爱连 (谢爱连.) [1] | 林碧瑜 (林碧瑜.) [2] | 牛丹丹 (牛丹丹.) [3] | NOKUTHULA Peace Mchunu (NOKUTHULA Peace Mchunu.) [4] | 叶秀云 (叶秀云.) [5]

Indexed by:

CQVIP PKU

Abstract:

碱性蛋白酶是一类重要的工业酶制剂。为进一步提高碱性蛋白酶在高温碱性条件下的活力,增强其工业应用价值,本文从地衣芽胞杆菌CCTCC M2018539中首先通过PCR扩增获得碱性蛋白酶编码基因aprE539并克隆入表达载体pND-113中,在枯草芽胞杆菌WB600中实现碱性蛋白酶AprE539的表达;重组酶AprE539经硫酸铵沉降(30%~70%)、透析、DEAE阴离子交换和超滤获得纯酶,并以SDS-PAGE电泳测定AprE539的分子量大小。结果表明,AprE539的分子量大小为30 kDa。进一步对其酶学性质研究表明:AprE539的最适作用pH为11.0,最适作用温度为65~70℃;在pH6.0~12.0范围内具有较好的稳定性;在60℃保温1 h后酶活剩余70%;Cu^2+、Mn^2+、Ca^2+和Mg^2+对酶活有明显促进作用。AprE539在氨基酸序列上仅有2个氨基酸残基与碱性蛋白酶2709存在差异,但其酶学特征差异明显,为后续进一步探究其酶学性质差异性奠定基础。

Keyword:

克隆与表达 地衣芽胞杆菌 耐热嗜碱性蛋白酶 酶学性质

Community:

  • [ 1 ] 福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州350108
  • [ 2 ] Department of Biotechnology and Food Technology,Faculty of Applied Sciences,Durban University of Technology,Natal Durban 4000

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Source :

食品工业科技

ISSN: 1002-0306

Year: 2019

Issue: 20

Volume: 40

Page: 101-106

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