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谢爱连 (谢爱连.) [1] | 林碧瑜 (林碧瑜.) [2] | 牛丹丹 (牛丹丹.) [3] | NOKUTHULA Peace Mchunu (NOKUTHULA Peace Mchunu.) [4] | 叶秀云 (叶秀云.) [5] (Scholars:叶秀云)

Indexed by:

CQVIP PKU CSCD

Abstract:

碱性蛋白酶是一类重要的工业酶制剂.为进一步提高碱性蛋白酶在高温碱性条件下的活力,增强其工业应用价值,本文从地衣芽胞杆菌CCTCC M20t8539中首先通过PCR扩增获得碱性蛋白酶编码基因aprE539并克隆入表达载体pND-113中,在枯草芽胞杆菌WB600中实现碱性蛋白酶AprE539的表达;重组酶AprE539经硫酸铵沉降(30%~70%)、透析、DEAE阴离子交换和超滤获得纯酶,并以SDS-PAGE电泳测定AprE539的分子量大小.结果 表明,AprE539的分子量大小为30 kDa.进一步对其酶学性质研究表明:AprE539的最适作用pH为11.0,最造作用温度为65~70℃;在pH6.0~12.0范围内具有较好的稳定性;在60 ℃保温lh后酶活剩余70%;Cu2、Mn2、Ca2+和Mg2+对酶活有明显促进作用.AprE539在氨基酸序列上仅有2个氨基酸残基与碱性蛋白酶2709存在差异,但其酶学特征差异明显,为后续进一步探究其酶学性质差异性奠定基础.

Keyword:

克隆与表达 地衣芽胞杆菌 耐热嗜碱性蛋白酶 酶学性质

Community:

  • [ 1 ] [谢爱连]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州350108
  • [ 2 ] [林碧瑜]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州350108
  • [ 3 ] [牛丹丹]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州350108
  • [ 4 ] [NOKUTHULA Peace Mchunu]Department of Biotechnology and Food Technology, Faculty of Applied Sciences, Durban University of Technology, Natal Durban 4000
  • [ 5 ] [叶秀云]福州大学生物科学与工程学院,福建省海洋酶工程重点实验室,福建福州350108

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Source :

食品工业科技

ISSN: 1002-0306

CN: 11-1759/TS

Year: 2019

Issue: 20

Volume: 40

Page: 101-106

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