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[期刊论文]

三聚氰胺多克隆抗体的制备、分离纯化及ELISA方法的测试研究

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author:

李昊 (李昊.) [1] (Scholars:李昊) | 翁惠玲 (翁惠玲.) [2] | 黄启龙 (黄启龙.) [3] | Unfold

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CQVIP PKU CSCD

Abstract:

目的:制备具有高特异性的三聚氰胺多克隆抗体,建立三聚氰胺快速检测方法.方法:通过抗原偶联嫁接技术,将不具备免疫原性的三聚氰胺与特定蛋白连接,制备免疫抗原(MB1st、MB2st、KM和ML2).对家兔进行皮下多点注射,初次免疫后取抗体血清,用SDS-PAGE检测血清中IgG的产生情况.采用酶联免疫吸附法测定各抗体血清的效价,最终以亲和层析法纯化血清,获得高特异性的抗体.将纯化后的抗体包被于酶标板上,建立三聚氰胺ELISA方法,并验证其有效性.结果:通过SDS-PAGE证明免疫前、后血清中IgG显著增长.进一步使用间接ELISA法测得各兔血清效价.MB1st免疫的效果最佳,其抗体血清对三聚氰胺的竞争率由纯化前的36.97%上升至纯化后的75.57%.MB2st免疫的抗体血清对三聚氰胺的竞争率由纯化前的30.80%上升至纯化后92.43%.KM免疫的抗体血清效价较低,其对三聚氰胺的竞争率由纯化前的11.95%上升至纯化后的96.09%.ML2免疫效价低,且其抗体血清在纯化前、后均对三聚氰胺没有显著的竞争性.由此建立ELISA方法,并初步验证了该方法的有效性.结论:本试验中制备的三聚氰胺抗体血清.经分离、纯化后得到对三聚氰胺具有较高竞争性的多克隆抗体,为建立酶联免疫方法,以检测食品中三聚氰胺含量提供了理论基础.

Keyword:

三聚氰胺 亲和层析 多克隆抗体 特异性 酶联免疫吸附

Community:

  • [ 1 ] [李昊]福州大学
  • [ 2 ] [翁惠玲]福州大学
  • [ 3 ] [黄启龙]福建出入境检验检疫局长乐机场办事处
  • [ 4 ] [沈晓妙]福州大学
  • [ 5 ] [高小尧]福州大学
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  • [ 8 ] [王浙峰]福州大学
  • [ 9 ] [饶平凡]福州大学

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Source :

中国食品学报

ISSN: 1009-7848

CN: 11-4528/TS

Year: 2011

Issue: 5

Volume: 11

Page: 169-175

Cited Count:

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30 Days PV: 0

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