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目的 研究连接TAT蛋白转导域的p53融合蛋白对人肝癌细胞株HepG 2的促凋亡作用.方法 用反转录法从人正常肝细胞株L-02中获得野生型p53基因cDNA,构建原核表达质粒pET-27b/p53及pET-27b/p53-TAT.IPTG诱导表达重组蛋白,重组蛋白经Ni-NTA柱纯化后,加入HepG 2细胞培养液上清,采用四唑氮盐比色法(MTT法)和单细胞凝胶电泳法检测p53及p53-TAT融合蛋白对HepG 2细胞生长的影响.结果 成功构建质粒pET-27b/p53及pET-27b/p53-TAT,表达纯化了p53蛋白及p53-TAT蛋白.MTT法和单细胞凝胶电泳法结果表明,与p53蛋白相比,p53-TAT融合蛋白能更有效地抑制HepG 2细胞生长、促进凋亡.结论 p53-TAT融合蛋白能够有效促进HepG 2细胞凋亡.
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海峡药学
ISSN： 1006-3765
CN： 35-1173/R
Year： 2012
Issue： 12
Volume： 24
Page： 272-275
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