[目的]从海洋来源的罗尼氏弧菌菌株BY中克隆得到一个具有琼胶酶活性的新基因,并对其进行重组表达.[方法]对实验室保藏的产琼胶酶菌株BY进行16S　rRNA基因序列分析,并构建系统发育树.根据已报道的琼胶酶基因序列的同源性,设计简并引物,利用降落PCR(Touch-down　PCR)及染色体步移技术扩增琼胶酶基因序列全长,对基因序列进行生物信息学分析.将目的基因插入pET22a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),对重组酶进行表达,利用DNS法测定了重组酶的酶活,对该重组琼胶酶酶学性质进行研究.[结果]克隆得到一条新的琼胶酶基因,命名为Vibrio　sp.BY　(GenBank登录号:AIW39921.1),Vibrio　sp.BY基因序列全长2232　bp,编码744个氨基酸,理论分子量为85　kD,Vibrio　sp.BY的氨基酸序列基因库中与已知的琼胶酶氨基酸序列Vibrio　sp.EJY3的相似度为86％.发酵液琼胶酶酶活力为71.73　U/mL,证明表达的蛋白为琼胶酶.酶学性质研究表明重组琼胶酶的最适温度及pH分别为50℃和7.0,并且具有较好的稳定性.[结论]利用染色体步移技术克隆得到一条新的琼胶酶基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)中实现了重组表达,为琼胶酶的应用奠定了基础.