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张熠 (张熠.) [1] | 洪文荣 (洪文荣.) [2] (Scholars:洪文荣) | 潘成奇 (潘成奇.) [3]

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CQVIP CSCD

Abstract:

利用生物信息学方法分析庆大霉素生物合成特色基因genN的功能,构建genN缺失的基因工程菌。首先运用分子生物学技术构建同源重组质粒pFU604,其次重组质粒经接合转移导入绛红色小单孢菌M. purpurea GK1101。最后,基于同源重组机制,利用安普霉素抗性筛选及PCR鉴定,得到genN基因缺失的工程菌(M. purpurea GKN-27)。结果显示:较!发菌GK1101,基因工程菌GKN-27不再继续合成庆大霉素C1a和C2b,阻断庆大霉素生物合成代谢流,并积累分子量为497、524、523、503四种新的中间代谢物,新的中间代谢物将有望开发新型药物。同时,也表明genN不是C -6′N甲基化酶编码基因。

Keyword:

genN 基因敲除 工程菌构建 庆大霉素 生物信息学

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  • [ 1 ] [张熠]福州大学
  • [ 2 ] [洪文荣]福州大学
  • [ 3 ] [潘成奇]福州大学

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Source :

工业微生物

ISSN: 1001-6678

CN: 31-1438/Q

Year: 2015

Issue: 1

Page: 50-55

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