The　sisomicin　production　was　found　to　be　non-associated　with　the　cell　growth　of　M.　inyoensis　F003.　When　starch　was　used　as　main　carbon　source,　the　maximal　specific　growth　rate　was　0.058　h-1,　and　the　maximal　specific　sisomicin　production　rate　was　0.0018　g/(g-h).　The　cells　of　M　inyoensis　F003　grew　well　at　10.0-25.0　g/L　maltose　or　7.5-15.0　g/L　glucose　in　fermentation　broth.　It　was　shown　by　HPLC　analysis　and　enzymatic　measurement　that　maltose　was　the　main　fermentable　sugar　during　the　fermentation,　and　sisomicin　biosynthesis　was　limited　when　the　level　of　fermentable　sugar　was　below　10.2　g/L.　The　apparent　activity　of　starch-hydrolytic　enzymes　in　the　batch　fermentation　of　M　inyoensis　F003　was　1/4　to　1/20　fold　of　the　maximum　value　0.84　g/(L-h)　in　sisomicin　biosynthesis　phase,　its　apparent　activity,　which　would　result　in　restriction　to　the　sisomicin　biosynthesis　by　the　limitation　of　fermentable　sugar　in　the　broth.　Sisomicin　above　0.5　g/L　was　inhibitive　to　its　biosynthesis.