为实现鱿鱼加工下脚料鱿鱼皮的高值化利用，本研究采用酶法制备鱿鱼皮蛋白肽。以多肽浓度和三氯乙酸可溶性氮指数（Trichloroacetic　acid-nitrogen　soluble　index，TCA-NSI）为评价指标，采用单因素和响应面试验优化酶解工艺参数，并对所制备蛋白肽的氨基酸组成、分子量分布、蛋白肽序列、抗氧化活性及其体外模拟消化特性进行表征。结果表明，最佳酶解工艺条件为酶解温度43.50　℃、酶解时间100　min、酶解pH7.50、胰蛋白酶与碱性蛋白酶比例2:1、加酶量4000　U/g，在此条件下其TCA-NSI可达89.02%±0.66%。所制备的鱿鱼皮蛋白肽其氨基酸组成均衡，必需氨基酸指数（Essential　amino　acid　index，EAAI）可达0.90。此外，鱿鱼皮蛋白肽含有43个多肽序列，其中38个肽段的分子质量低于1800　Da，其DPPH自由基、ABTS+自由基和羟自由基清除率的IC50分别为0.61、0.28和1.95　mg/mL，且经体外模拟胃肠消化后仍能维持较好的抗氧化活性。本研究结果为鱿鱼加工下脚料的开发利用和精深加工提供了理论依据。