依据黄嘌呤氧化酶和辣根过氧化物酶催化反应的特征,研究了以黄嘌呤氧化酶-辣根过氧化物酶-苯酚-4-氨基安替比林为反应显色体系,建立了检测血清和组织中次黄嘌呤浓度的新方法。通过对该测定体系影响因素的考察,确定最佳反应条件为:黄嘌呤氧化酶(XO,EC1.2.3.22)0.32U·mL^-1,辣根过氧化物酶(HRP)7.0U·mL^-1,4-氨基安替比林(AAP)1mmol·L^-1,苯酚(PA)6mmol·L^-1溶于100mmol·L^-1　Tris-HCL缓冲液(pH8.3);反应温度为37℃,保温时间为8min;检测波长为508nm。测定次黄嘌呤浓度的线性范围为0.2~3.0mmol·L^-1,线性关系良好(r=0.9979),检测限为0.05mmol·L^-1。方法操作简单易行,测定结果准确可靠。可有效应用于普通实验室和常规临床血液生化检测。