为了充分发挥出突变株的高转化活性及其优良特性,采用响应面试验设计方法优化(R)-肾上腺素高产菌株Kocuria　rhizophila(k.rhizophila).H5401的发酵培养基。用Plackett—Burman设计法研究初始发酵培养基中各成分对(R)-肾上腺素产率的影响,筛选出有显著效应的3个因素:甘油、蛋白胨和NH4H2PO4。利用最陡爬坡法逼近最大响应区域。通过Box-Behnken中心组合实验和响应面分析方法确定出3个主要影响因素的最佳浓度。实验结果经过回归分析拟合出1个2次方程,用其预报的最优培养基做摇瓶发酵试验,(R)-肾上腺素产率达61.07%,比优化前提高了24.89%,表明响应面试验设计优化方法有效提高了(R)-肾上腺素的产量,降低了生产成本,为后续放大实验提供依据。