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李仁宽 (李仁宽.) [1] | 孙立国 (孙立国.) [2] | 吕元辉 (吕元辉.) [3] | 刘树滔 (刘树滔.) [4] (Scholars:刘树滔) | 饶平凡 (饶平凡.) [5]

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利用RT-PCR技术从人的肝细胞中克隆出成熟蛋白过氧化氢酶(catalase)的基因,通过PCR将其与TAT基因融合形成融合基因(catalase-TAT);将catalase-TAT基因构建到表达质粒pET21a(+)中,转入大肠杆菌Rosetta2 (DE3);通过IPTG诱导,转化子成功表达出catalase-TAT融合蛋白.重组菌发酵菌体破碎液经过硫酸铵沉降和Sp-5pw阳离子交换色谱,分离得到电泳纯的目的蛋白,其纯化倍数为18.51倍;经理化性质分析确定了此融合蛋白的最适pH和温度稳定性;细胞实验表明融合蛋白catalase-TAT能够明显提高胞内的过氧化氢酶活性.

Keyword:

TAT 融合表达 表征 过氧化氢酶

Community:

  • [ 1 ] [李仁宽]福州大学
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  • [ 5 ] [饶平凡]福州大学

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福州大学学报(自然科学版)

ISSN: 1000-2243

CN: 35-1337/N

Year: 2012

Issue: 5

Volume: 40

Page: 684-689

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