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目的:分离纯化一种黑芸豆凝集素,并对其部分生物活性进行表征和研究.方法:采用缓冲液抽提、AF-Blue HC-650M亲和色谱、CMSephadex c-25阳离子交换色谱及Sephadex G-50凝胶过滤色谱进行分离纯化,通过SDS-PA GE进行分析鉴定,并对其凝血活性、抗真菌活性进行表征.结果:从黑芸豆中分离纯化出一种凝集素,命名为BKBL,经SDS-PAGE鉴定已达电泳纯.BKBL为单体蛋白,相对分子质量为36kDa,经PAS染色鉴定为糖蛋白,含糖量11.9%.其对人血和小鼠血均具有一定的凝集活性,但对小鼠血的凝集活性高于人血.BKBL凝血活性在70℃以下、pH2-10范围内高度稳定,pHll处理30min后活性保留50%,100℃处理30min后活性完全丧失.EDTA会对其凝血活性产生抑制作用.抑菌实验表明,BKBL对黑曲霉、香蕉尖孢镰刀菌、锥栗炭疽病病菌、莲细极链格孢菌、瓜果腐霉病菌、葡萄灰霉菌具有抑制作用.结论:可从黑芸豆分离纯化出的一种凝集素,对小鼠血有较高的凝集活性,性质稳定,对多种真菌有抑制作用.
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Year: 2012
Page: 144-145
Language: Chinese
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