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王军 (王军.) [1] | 洪永祥 (洪永祥.) [2] | 蔡茜茜 (蔡茜茜.) [3] | 李巧玲 (李巧玲.) [4] | 汪少芸 (汪少芸.) [5] | 饶平凡 (饶平凡.) [6]

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Abstract:

从大白芸豆种子中,经过缓冲液抽提、硫酸铵沉降、蓝胶亲和色谱(AF-Blue HC-650M)、离子交换色谱(CM-Sephadex C-25)、凝胶过滤色谱(Sephadex G-50)等步骤,分离纯化了一种具有一定抗真菌活性和抗肿瘤活性的凝集素,命名为WKB L.经SDS-PAGE显示,WKBL分子量为25 kD,N端序列为DAVLYRGPGDLHTGS,过碘酸-雪夫染色(PAS)呈红色.凝血活性实验显示,WKBL凝血效果明显,但只有在60℃以下才具有凝血活性,而pH对其活性影响并不大.D-半乳糖、D-果糖、D-葡萄糖、甘露醇能抑制WKBL的活性.WKBL为金属依赖型凝集素,LiCl、SnC12和K2Cr2O7能抑制WKBL活性,但CaC12、BaC12、ZnC12、CuCI2、FeCI3和MgCI2对WKBL活性却无影响.WKBL对白血病细胞K562的生长显示出较强的抑制作用,其IC50为15μmoL/L,对HeLa细胞呈现抑制作用,对HepG2细胞的抑制作用不明显.抑菌实验显示,WKBL对瓜果腐霉菌(Pythium aphanidermatum)、苹果轮纹病菌(Physalospora piricola)、甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.nelonis)和葡萄灰霉病菌(Botrytis cinerea)呈现出一定的抑制,但是其抑制率对浓度的依赖性并不高.

Keyword:

凝血 凝集素 分离纯化 大白芸豆 抗真菌

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中国生物化学与分子生物学报

ISSN: 1007-7626

CN: 11-3870/Q

Year: 2012

Issue: 7

Volume: 28

Page: 637-644

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