为了给表达高活性的抗冻肽提供开发应用的依据,进一步为用基因工程方法生产制备抗冻活性肽提供理论基础,本研究应用分子生物学手段表达获得重组的丝胶肽,采用亲和色谱方法分离纯化重组肽,并对其进行了细胞冻藏保护活性、重结晶抑制活性、热滞活性等抗冻活性分析。研究结果表明通过PCR获得丝胶肽DNA序列,经KpnI与XhoI双酶切后将丝胶肽重组基因(SerD)插入到大肠杆菌表达质粒pET32a中,构建重组表达质粒pET32a/SerD,并转化至E　coli　DH5a大肠杆菌菌株,经IPTG诱导表达、抗性筛选成功获得丝胶肽表达的重组菌株。经过镍琼脂糖亲和层析、EK酶酶切处理制备得到重组表达丝胶肽,抗冻活性显示其对冻藏乳酸菌能较好保持增长活力,具有明显的冰晶抑制活性和一定的热滞活性。本研究结果可为研制工业应用的高效抗冻制剂提供一定理论参考。