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牛丹丹 (牛丹丹.) [1] | 贾超 (贾超.) [2] | 田晓靓 (田晓靓.) [3] | Suren Singh (Suren Singh.) [4] | 路福平 (路福平.) [5] | 林娟 (林娟.) [6] (Scholars:林娟) | 叶秀云 (叶秀云.) [7] (Scholars:叶秀云)

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Abstract:

通过分子克隆与遗传重组技术克隆及表达黑曲霉F0215来源的全部β-半乳糖苷酶,构建了重组菌GS115(pPIC-bglA)、GS115(pPIC-bglB)、GS115(pPIC-bglC)和GS115(pPIC-bglE);通过摇瓶发酵和甲醇诱导培养,制备相应的重组β-半乳糖苷酶BglA、BglB、BglC和BglE.重组酶BglA、BglB、BgC和BglE的最适作用温度分别是60,50,60,50℃;最适反应pH分别为4.0,4.5,3.5,4.5;Mg2+、Ca2+、Na+和Mn2+对上述酶的活性均有促进作用,Cu2+、Fe2+、Ni2+、Zn2、Li+和EDTA对上述酶的活性均有抑制作用;以ONPG为底物,采用双倒数作图法测得BglA、BglB、BglC和BglE的Km分别是0.43,0.22,0.37 mmol/L和0.46 mmol/L;BglA、BglB、BglC和BglE对乳糖具有单一的特异性,包含水解与转苷两种基本活性;黑曲霉β-半乳糖苷酶的分子结构呈现典型的真菌β-半乳糖苷酶结构特征.在参照基因组中预示存在的β-半乳糖苷酶BglD,在所试黑曲霉菌种中不存在.

Keyword:

β-半乳糖苷酶 酶学特征 黑曲霉基因组

Community:

  • [ 1 ] [牛丹丹]福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室 福建福州350116;天津科技大学生物工程学院 天津300457
  • [ 2 ] [贾超]天津科技大学
  • [ 3 ] [田晓靓]天津科技大学
  • [ 4 ] [Suren Singh]德班理工大学食品科学与生物系 南非德班4000
  • [ 5 ] [路福平]天津科技大学
  • [ 6 ] [林娟]福州大学
  • [ 7 ] [叶秀云]福州大学

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Source :

中国食品学报

ISSN: 1009-7848

CN: 11-4528/TS

Year: 2017

Issue: 11

Volume: 17

Page: 198-207

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