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学者姓名：管玉霞
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研究了N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌产素的影响,实验探索了N-乙酰氨基葡萄糖添加工艺,在250mL摇瓶发酵过程中培养48h,60h分别添加0.05%,0.15%N-乙酰氨基葡萄糖可使庆大霉素生测效价达2 030U/mL,较对照1 228U/mL提高了65%以上(三次平均基本一致);5L发酵罐试产三批次发酵终结,生测效价平均为1 727U/mL(厡工艺1 097U/mL)提高了57%,效果十分明显.同时测定了发酵过程中菌体代谢各种参数的变化,证明了N-乙酰氨基葡萄糖在绛红小单孢菌生物合成中的促进作用.本方法操作简单,基本不改变原工艺,生产成本低廉,对提高庆大霉素产量效果非常明显.
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N-乙酰氨基葡萄糖 N-乙酰氨基葡萄糖 代谢参数 代谢参数 庆大霉素 庆大霉素 生测效价 生测效价 绛红色小单孢菌 绛红色小单孢菌
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| GB/T 7714 | 管玉霞 , 孙甲贤 , 王静 . N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌合成庆大霉素的影响 [J]. | 中国科学技术大学学报 , 2011 , 41 (11) : 1022-1027 . |
| MLA | 管玉霞 等. "N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌合成庆大霉素的影响" . | 中国科学技术大学学报 41 . 11 (2011) : 1022-1027 . |
| APA | 管玉霞 , 孙甲贤 , 王静 . N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌合成庆大霉素的影响 . | 中国科学技术大学学报 , 2011 , 41 (11) , 1022-1027 . |
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Abstract ：
A method was established to determine the activity of hexokinase by reverse-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC). The activity of hexokinase was determined by detecting the amount of ADP in the reaction that converts glucose into glucose-6-phosphate. The separation degree of ATP and ADP was as good as 3.46 (separation degree >1.5). In the range of 0.01-0. 40 mmol/L, there was a good linear relationship between concentration of ADP and its peak areas (the correlation coefficient was 0.999). The relative standard deviation(RSD) of intraday was 1.43%-1. 46%, that of interday was 2.12%-2.15%. At 30 °C (optimal temperature) and pH7.0 (optimal pH), the recovery rate of hexokinase was 95.3%-97.6%. The results showed that the method had good precision and high recovery rate, and the enzyme activity was determined through only one-step reaction. To some extent, this method can reduce the cost. © 2011 Wuhan University and Springer-Verlag Berlin Heidelberg.
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enzyme activity assay; hexokinase; reverse-phase high-performance liquid chromatography(RP-HPLC) enzyme activity assay; hexokinase; reverse-phase high-performance liquid chromatography(RP-HPLC)
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| GB/T 7714 | Guan, Y. , Wang, J. , Sun, J. . A method for determination of hexokinase activity by RP-HPLC [J]. | Wuhan University Journal of Natural Sciences , 2011 , 16 (6) : 535-540 . |
| MLA | Guan, Y. 等. "A method for determination of hexokinase activity by RP-HPLC" . | Wuhan University Journal of Natural Sciences 16 . 6 (2011) : 535-540 . |
| APA | Guan, Y. , Wang, J. , Sun, J. . A method for determination of hexokinase activity by RP-HPLC . | Wuhan University Journal of Natural Sciences , 2011 , 16 (6) , 535-540 . |
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Abstract ：
采用庆大霉素产生菌一绛红小单孢菌(M.purpurea)在培养36h时添加15μg/ml的青霉素,对培养至48h对数生长期的菌体进行紫外线照射+亚硝基胍复合处理,置培养箱中37℃培养5～8d待长出菌落后再用紫外线照射叠加处理,获得一高产菌株N-14.试管发酵生测效价1913u/ml(对照625u/ml);摇瓶发酵培养120h达2178(u/ml),比对照(1243u/ml)提高75.2%;并进行了5L发酵罐发酵培养,发酵过程中测定了发酵液还原糖、总糖、氨基氮、pH、菌体浓度等代谢参数,探索了适合N-14的培养条件,连续5批次生测效价平均1967u/ml,较对照1171u/ml提高了68%,效果明显.
Keyword ：
代谢参数 代谢参数 叠加诱变 叠加诱变 生测效价 生测效价 绛红小单孢菌 绛红小单孢菌
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| GB/T 7714 | 管玉霞 , 孙甲贤 , 王静 et al. 小单孢菌叠加诱变与发酵过程的研究 [J]. | 中国生物工程杂志 , 2011 , 31 (4) : 77-82 . |
| MLA | 管玉霞 et al. "小单孢菌叠加诱变与发酵过程的研究" . | 中国生物工程杂志 31 . 4 (2011) : 77-82 . |
| APA | 管玉霞 , 孙甲贤 , 王静 , 郑遵纪 . 小单孢菌叠加诱变与发酵过程的研究 . | 中国生物工程杂志 , 2011 , 31 (4) , 77-82 . |
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Abstract ：
研究了N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌产素的影响,实验探索了N-乙酰氨基葡萄糖添加工艺,在250mL摇瓶发酵过程中培养48h,60h分别添加0.05％,0.15％N-乙酰氨基葡萄糖可使庆大霉素生测效价达2030U/mL,较对照1228U/mL提高了65％以上(三次平均基本一致)；5L发酵罐试产三批次发酵终结,生测效价平均为1727U/mL(厡工艺1097U/mL)提高了57％,效果十分明显.同时测定了发酵过程中菌体代谢各种参数的变化,证明了N-乙酰氨基葡萄糖在绛红小单孢菌生物合成中的促进作用.本方法操作简单,基本不改变原工艺,生产成本低廉,对提高庆大霉素产量效果非常明显.
Keyword ：
N-乙酰氨基葡萄糖 N-乙酰氨基葡萄糖 代谢参数 代谢参数 庆大霉素 庆大霉素 生测效价 生测效价 绛红色小单孢菌 绛红色小单孢菌
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| GB/T 7714 | 管玉霞 , 孙甲贤 , 王静 . N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌合成庆大霉素的影响 [J]. | 中国科学技术大学学报 , 2011 , 41 (11) : 1022-1027 . |
| MLA | 管玉霞 et al. "N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌合成庆大霉素的影响" . | 中国科学技术大学学报 41 . 11 (2011) : 1022-1027 . |
| APA | 管玉霞 , 孙甲贤 , 王静 . N-乙酰氨基葡萄糖对绛红小单孢菌合成庆大霉素的影响 . | 中国科学技术大学学报 , 2011 , 41 (11) , 1022-1027 . |
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Abstract ：
通过N-芴甲氧羰基(N-fluorenylmethoxycarbonyl,Fmoc) 作为α-氨基的保护基, 以逐个延伸的固相合成法合成TAT-PTD多肽,运用高效液相色谱和质谱鉴定合成多肽的纯度和相对分子质量.通过紫外吸收光谱和琼脂糖凝胶电泳阻滞实验研究合成的TAT-PTD多肽与质粒DNA相互作用,实验表明TAT-PTD多肽与质粒DNA可以通过静电作用相互吸引、靠近并结合,于是为下一步小单孢菌基因工程的细胞转导提供了依据.
Keyword ：
TAT-PTD多肽 TAT-PTD多肽 小单孢菌 小单孢菌 琼脂糖凝胶阻滞电泳 琼脂糖凝胶阻滞电泳 紫外吸收光谱 紫外吸收光谱 质粒DNA 质粒DNA
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| GB/T 7714 | 管玉霞 , 罗泓 , 王锡平 . 穿膜肽TAT-PTD的固相合成及其与DNA相互作用的研究 [J]. | 中山大学学报（自然科学版） , 2010 , 49 (z1) : 94-98 . |
| MLA | 管玉霞 et al. "穿膜肽TAT-PTD的固相合成及其与DNA相互作用的研究" . | 中山大学学报（自然科学版） 49 . z1 (2010) : 94-98 . |
| APA | 管玉霞 , 罗泓 , 王锡平 . 穿膜肽TAT-PTD的固相合成及其与DNA相互作用的研究 . | 中山大学学报（自然科学版） , 2010 , 49 (z1) , 94-98 . |
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Abstract ：
本发明涉及一种增加庆大霉素产量的方法，该方法采用绛红色小单孢菌(Micromonosporapurpurea)或所有适用于生产庆大霉素的小单孢菌属(Micromonospora)为生产菌株，其发酵培养基配方为：可溶性玉米淀粉、黄豆饼粉、玉米粉、蛋白胨、葡萄糖、硝酸钾、硫酸锰、氯化钴、碳酸钙、豆油、甘油聚醚、O-羧甲基壳聚糖、硫酸壳聚糖、壳聚糖、十二烷基化壳聚糖、胞壁酸、乳糖、半乳糖、甘露糖、剩余为水。该方法通过改进培养基配方，使被选用的菌株能够充分发掘微生物细胞自身产生抗生素的能力，在发酵周期与传统工艺相同的情况下，抗生素发酵单位生测效价比原工艺生测效价(对照100%)，提高至120%～140%，具有投入少、产出多，成本低、效益高的优点。
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| GB/T 7714 | 管玉霞 , 孙甲贤 , 郑晓波 et al. 增加庆大霉素产量的方法 : CN201010536190.0[P]. | 2010/11/9 . |
| MLA | 管玉霞 et al. "增加庆大霉素产量的方法" : CN201010536190.0. | 2010/11/9 . |
| APA | 管玉霞 , 孙甲贤 , 郑晓波 , 王静 . 增加庆大霉素产量的方法 : CN201010536190.0. | 2010/11/9 . |
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Abstract ：
建立了反相高效液相色谱(Reverse Phase liquid Chromatography,RP-HPLC)测定庆大霉素效价的方法,结合管碟法所做的生物效价进行比较,其相关度R2=0.9823,RSD=1.29,证明RP-HPLC可直接测定庆大霉素的效价,从而解决了生测效价程序复杂,人为误差大的问题.RP-HPLC测定方法:采用岛津高效液相色谱SPD-10AVP、UV-VIS、LC-10ATVP,PepMapC18Tmm4.6×150 mmSilica C18(5 μm300A)PhenomenexODS色谱柱,流动相MILLI-Q水:冰醋酸:甲醇(比例为25:5:70)配置0.02mol/L庚烷磺酸钠溶液,流速1.0 mL/min,检测波长330 nm,检测灵敏度0.020 AUFS,柱温为室温,进样量20μL,在10 min内可对样品液中C1、C1a、C2a、C24种物质同时进行定性定量测定.
Keyword ：
反相高效液相色谱 反相高效液相色谱 庆大霉素 庆大霉素 效价 效价
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| GB/T 7714 | 管玉霞 , 蓝基贤 . 反相高效液相色谱测定庆大霉素效价方法的研究 [J]. | 世界科技研究与发展 , 2009 , 31 (4) : 586-588 . |
| MLA | 管玉霞 et al. "反相高效液相色谱测定庆大霉素效价方法的研究" . | 世界科技研究与发展 31 . 4 (2009) : 586-588 . |
| APA | 管玉霞 , 蓝基贤 . 反相高效液相色谱测定庆大霉素效价方法的研究 . | 世界科技研究与发展 , 2009 , 31 (4) , 586-588 . |
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Abstract ：
采用反相高效液相法(RP-HPLC)测定磷酸果糖激酶的活性.将磷酸果糖激酶与含有果糖-6-磷酸和ATP的反应体系混合,置于30℃水浴中,反应20 min后,沸水浴3 min终止反应.通过RP-HPLC测定酶反应前后产物二磷酸腺苷(ADP)量的变化来分析酶的活性.ADP的生成量在5～400 mg/L范围内具有良好的线性关系,方法的精密度良好(RSD<5%).本方法与通常所用的酶偶联法(ECM)相比准确度高,且简便易行.
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反相高效液相色谱法 反相高效液相色谱法 活性测定 活性测定 磷酸果糖激酶 磷酸果糖激酶
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| GB/T 7714 | 管玉霞 , 张洪秀 , 邢莉丽 . 反相高效液相色谱法测定磷酸果糖激酶的活性 [J]. | 分析科学学报 , 2009 , 25 (2) : 211-213 . |
| MLA | 管玉霞 et al. "反相高效液相色谱法测定磷酸果糖激酶的活性" . | 分析科学学报 25 . 2 (2009) : 211-213 . |
| APA | 管玉霞 , 张洪秀 , 邢莉丽 . 反相高效液相色谱法测定磷酸果糖激酶的活性 . | 分析科学学报 , 2009 , 25 (2) , 211-213 . |
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Abstract ：
根据小单孢菌产生庆大霉素的生物合成机理,利用基因克隆方法从棘孢小单孢菌(Micromonospora echinospora)基因组中扩增出庆大霉素生物合成的关键酶基因-2-脱氧青蟹肌糖合成酶基因(GntB),并将其通过大肠杆菌/链霉菌穿梭质粒pIJ699转化原菌株,采用硫链丝菌素抗性基因启动子带动2-脱氧青蟹肌糖合成酶基因在棘孢小单孢菌细胞中实现了转化.
Keyword ：
2-脱氧青蟹肌糖合成酶基因(GntB) 2-脱氧青蟹肌糖合成酶基因(GntB) pIJ699 pIJ699 克隆 克隆 棘孢小单孢菌 棘孢小单孢菌 转化 转化
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| GB/T 7714 | 管玉霞 , 刘志琼 . 庆大霉素产生菌GntB基因的克隆与转化 [J]. | 世界科技研究与发展 , 2009 , 31 (3) : 417-419 . |
| MLA | 管玉霞 et al. "庆大霉素产生菌GntB基因的克隆与转化" . | 世界科技研究与发展 31 . 3 (2009) : 417-419 . |
| APA | 管玉霞 , 刘志琼 . 庆大霉素产生菌GntB基因的克隆与转化 . | 世界科技研究与发展 , 2009 , 31 (3) , 417-419 . |
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Abstract ：
对庆大霉素产生菌绛红色小单孢菌(Micromonospora purpurea)原生质体分别用硫酸二乙酯(DES)和紫外线(uv)进行诱变、融合,用庆大霉素进行抗性筛选、再生后得到高产菌株;经摇瓶连续10批次发酵考查,平均发酵单位在2200±U/ml;又经5L发酵罐连续发酵考查7批次,产量平均1900±U/ml.产品质量符合药典.
Keyword ：
原生质体诱变融合 原生质体诱变融合 发酵罐产量 发酵罐产量 抗性筛选 抗性筛选 绛红色小单孢菌 绛红色小单孢菌
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| GB/T 7714 | 管玉霞 , 蓝基贤 , 严广兴 et al. 庆大霉素产生菌原生质体融合高产株与发酵罐试产的研究 [J]. | 中国生物工程杂志 , 2009 , 29 (8) : 62-67 . |
| MLA | 管玉霞 et al. "庆大霉素产生菌原生质体融合高产株与发酵罐试产的研究" . | 中国生物工程杂志 29 . 8 (2009) : 62-67 . |
| APA | 管玉霞 , 蓝基贤 , 严广兴 , 郑景世 . 庆大霉素产生菌原生质体融合高产株与发酵罐试产的研究 . | 中国生物工程杂志 , 2009 , 29 (8) , 62-67 . |
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