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周建森 (周建森.) [1] | 刘树滔 (刘树滔.) [2]

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利用基因工程技术构建高效表达人源EC-SOD的毕赤酵母工程菌株。将人源EC-SOD基因进行密码子优化后插入pPICZαA质粒中构建真核表达载体,将表达载体转入至甲醇营养型毕赤酵母P.pastoris X-33中构建真核表达菌株,通过SOD酶活力测定和蛋白电泳验证EC-SOD的表达,测定SOD酶活力和基因表达水平随诱导时间的变化,并进行相关性分析。结果表明:EC-SOD毕赤酵母表达菌株成功分泌表达了EC-SOD,摇瓶发酵的酶活力为141 U/mL,蛋白分子量约为26.5 ku,随诱导时间的增加,EC-SOD酶活力和基因表达水平均表现为先上升后下降趋势,EC-SOD酶活力和基因表达水平呈显著正相关。结果表明人源EC-SOD的毕赤酵母重组菌株构建成功。

Keyword:

EC-SOD 密码子优化 构建 毕赤酵母 表达

Community:

  • [ 1 ] 福建林业职业技术学院
  • [ 2 ] 福州大学生物工程研究所

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Source :

福建轻纺

Year: 2025

Issue: 08

Volume: PageCount-页数: 6

Page: 3-8

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