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目的:探讨新型大黄素衍生物YX-18对伯基特淋巴瘤(BL)细胞的作用和机制。方法:不同浓度YX-18分别作用BL细胞株CA46和Raji细胞,MTT法检测YX-18对BL细胞株CA46和Raji增殖的影响,Annexin V-PE/7-AAD双染法检测YX-18对CA46和Raji细胞凋亡的影响,PI/RNase染色法检测YX-18对CA46和Raji细胞周期的影响,JC-1法检测YX-18作用后细胞线粒体膜电位的变化及DAPI染色检测细胞凋亡形态,Western blot检测YX-18对NF-κB通路蛋白(P65、P-P65、IκB、P-IκB)在胞浆和胞细胞核中的分布变化,细胞周期相关蛋白P21、CDK2、P-CDK2、Cycling D1、Cycling E1以及凋亡、增殖相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、C-MYC、BCL-2的表达变化,实时荧光定量PCR技术检测YX-18对CA46、Raji细胞的C-MYC、Ki-67的m RNA和Raji (EBV~+)细胞EBV的EBEA-1、EBER的m RNA表达的影响。结果:大黄素衍生物YX-18能有效抑制BL细胞株CA46和Raji的增殖并呈时间依赖效应(24,48和72 h分别r_(CA46)=0.89、0.75和0.75,r_(Raji)=0.87、0.73和0.64)。作用两种细胞24 h的IC_(50)分别为1.77±0.04和1.97±0.22μmol/L。YX-18 2.0、4.0μmol/L分别作用两种细胞24 h均出现明显凋亡,与药物浓度呈正相关(r_(CA46)=0.99,r_(Raji)=0.92),且两种细胞Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9不同程度被活化。YX-18 1.0、2.0μmol/L作用CA46细胞24 h及0.5、1μmol/L作用Raji细胞24 h后,两种细胞均明显阻滞在G_0/G_1期(P<0.01);经过不同浓度YX-18处理两种细胞的周期相关蛋白Cyclin D1、Cyclin E1、CDK2、P-CDK2表达水平均下降,p21~(Waf1/Cip1)与对照组相比,表达水平上升。以YX-18 2.0、4.0μmol/L分别作用两种细胞24 h后,线粒体膜电位下降(r_(CA46)=-0.96,r_(Raji)=-0.99);且DAPI染色可见经YX-18处...
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中国实验血液学杂志
Year: 2021
Issue: 02
Volume: 29
Page: 474-488
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