基于单糖与1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮的柱前衍生，采用反相高效液相色谱（HPLC）梯度洗脱/紫外检测联用技术，建立了凉粉草多糖水解单糖的HPLC指纹图谱，用于凉粉草水提溶液中多糖水解单糖组分分析，鉴别测定了水解单糖组分中核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖等8种单糖含量，开展了不同地区的凉粉草多糖水解单糖的HPLC指纹图谱相似度分析、聚类分析和主成分分析。研究表明，不同地区凉粉草水解单糖组分中半乳糖、半乳糖醛酸和葡萄糖是样本聚类的重要变量，地区差异导致聚类分析差异，不同产地的凉粉草中多糖水解产生的单糖组分含量和分布具有一定的差异。方法可为凉粉草水提溶液中多糖水解单糖组分的评价提供一定的技术支持。