To　improve　the　sensitivity　and　detection　limit　of　probe,　we　made　good　use　of　the　advantage　of　6-carboxyrhodamine　to　design　a　new　cholesterol-conjugated　fluorescent　probe　Chol-6RN　for　Cu2+　detection.　The　probe　Chol-6RN　exhibits　a　sensitive　response　towards　Cu2+　by　fluorescence　spectrum　in　aqueous　solution.　The　linearity　of　Chol-6RN　is　from　5　mu　M　to　40　mu　M　of　Cu2+　with　an　excellent　linear　correlation　(R-2　=　0.99110)　and　the　detection　limit　for　Cu2+　is　1.12　mu　M,　they　are　better　than　the　control　probe　Chol-RN.　The　MTT　assay　indicates　that　Chol-6RN　is　negligible　cytotoxicity　to　HeLa　cells　after　24　h　at　a　concentration　less　than　30　mu　M.　The　cell　imaging　displays　that　Chol-6RN　is　capable　of　detecting　Cu2+　in　live　cells　and　the　sensibility　of　Chol-6RN　is　better　than　Chol-RN.