建立了液相色谱同时检测水产品中亚甲基蓝及其代谢物天青A、天青B、天青C残留的方法并用于样品检测。试样中残留的药物以含离子对试剂对甲苯磺酸的乙酸铵缓冲液-乙腈提取,二氯甲烷反萃,MCAX固相萃取小柱净化,液相色谱测定。对提取、净化及仪器分离分析条件进行了探讨,对亚甲基蓝在分析过程的稳定性进行了研究。水产品中4种化合物在0.005~0.50mg/kg范围内线性关系良好,相关系数为0.9946~0.9978。在0.005~0.5mg/kg浓度范围内,平均加标回收率为75.9%~93.2%;相对标准偏差为3.3%~11.9%;AZA、AZB、AZC、MB的检出限分别为1.27、0.98、1.48和1.33μg/kg。方法稳定可靠,可满足水产品中亚甲基蓝及其代谢物的检测需要。