【目的】以实验室筛选获得的一株长梗木霉GM2(Trichodermalongibrachiatum)为材料,克隆出其β-葡萄糖苷酶(p.Glucosidase)基因bglI并在大肠杆菌和酵母中进行表达。【方法】利用同源克隆扩增出其β-葡萄糖苷酶基因bglI全长序列,分别亚克隆到质粒pET-32a(+)和pPICZα-B中,构建其原核表达载体pET32a(+)-bglI和真核表达载体pPICZα-B-bglI。【结果】bglI基因序列全长2369bp,含两个内含子,编码744个氨基酸。在大肠杆菌BL21(DE3)中表达bglI,重组蛋白以包涵体形式存在,上清液中没有β-葡萄糖苷酶的酶活。将载体pPICZα-B-bglI电转化入毕赤酵母GSll5,得到78kD左右重组蛋白,与预测大小相符。按9%接种量接入50mLYP培养基(初始pH5.5),30℃振荡培养96h,添加终浓度1%的甲醇诱导后β-葡萄糖苷酶酶活达60U/mL。重组酶bglI催化水杨苷水解反应的最适pH为5.0,最适温度为70℃;另外,此bglI在pH3.0-10.0和40℃-60℃范围内具有比较好的稳定性。【结论】长梗木霉GM2的β-葡萄糖苷酶在尸pastoris中获得可溶性表达,并证明有一定的活性。