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利用基因组重排技术对产纤维素酶菌株里氏木霉T306进行育种研究,考察原生质体制备、再生及融合条件的影响因素。研究表明,里氏木霉原生质体制备和再生的最佳条件是:3.5%溶壁酶,菌丝菌龄22 h,酶解时间4 h,酶解温度30℃,采用pH 5.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液,以高渗筛选培养基为再生培养基,再生培养基中渗透压稳定剂为0.8 mol/L NaCl。在此条件下,里氏木霉原生质体量达1.44×10~7个/m L,再生率为2.64%。融合试验结果表明,将紫外照射90 s和微波辐射200 s两种方式灭活的原生质体融合,在30%PEG、30 mmol/L Ca~(2+)、30℃条件下处理12 min,...
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中国食品学报
ISSN： 1009-7848
CN： 11-4528/TS
Year： 2016
Issue： 11
Volume： 16
Page： 105-111
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