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方志锴 (方志锴.) [1] | 洪文荣 (洪文荣.) [2] (Scholars:洪文荣) | 严凌斌 (严凌斌.) [3]

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CQVIP PKU CSCD

Abstract:

目的:建立金色链霉菌基因敲除体系,敲除金色链霉菌J13中的ctcF基因,研究工程菌的代谢变化.方法:采用基因置换和框内缺失技术,对ctcF基因进行敲除.结果:利用接合转移的方法,将质粒pFD109导入到金色链霉菌J13中,经抗性筛选及PCR验证获得ctcF基因置换菌株金色链霉菌A1 - 20;将质粒pFD111经接合转移导入到A1 -20中,获得ctcF基因框内缺失菌株金色链霉菌K2-46;以上工程菌的发酵组分经HPLC分析,发现金霉素发酵单位显著降低.结论:获得的接合子发生双交换的概率可达18%以上,建立及验证了金色链霉菌基因敲除体系的实用性和可操作性,并初步推测ctcF为金霉素生物合成中的调控基因.

Keyword:

ctcF 分子遗传工程 基因敲除 金色链霉菌

Community:

  • [ 1 ] [方志锴]福州大学
  • [ 2 ] [洪文荣]福州大学
  • [ 3 ] [严凌斌]福州大学

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Source :

生物技术

ISSN: 1004-311X

CN: 23-1319/Q

Year: 2011

Issue: 6

Volume: 21

Page: 1-4

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