目的　阻断黑暗链霉菌中安普霉素和氨甲酰妥布霉素的合成,构建主产妥布霉素工程菌.方法　以安普霉素生物合成基因apr为靶标,克隆其上下游序列作为同源交换臂,构建重组质粒pXJ401,利用接合转移技术将其导入黑暗链霉菌Tt-49,获得工程菌TX302,并在此基础上敲除氨甲酰基转移酶基因tobZ,获得工程菌TX308.采用MS法,检测工程菌次级代谢产物的变化.结果　TX302主产氨甲酰妥布霉素,未检测到安普霉素.TX308不再合成氨甲酰妥布霉素,产物只检测到妥布霉素.结论　磷酸变位酶基因apr是安普霉素生物合成的关键基因,敲除后能有效阻断安普霉素的合成,工程菌TX308大量积累妥布霉素,不再合成安普霉素和氨甲酰妥布霉素,具有重要的产业化价值.