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目的:筛选产甘露聚糖酶的海洋微生物.方法:采用2216E、海水-高氏一号和海水-PDA培养基对采集的微生物进行分离纯化,采用平板透明圈法对菌株进行初筛,并对初筛中HC值较大的菌株通过发酵测酶活复筛;采用16S rDNA序列分析,并结合细胞和菌落形态观察及部分生理生化试验,对菌株进行鉴定;利用硫酸铵盐析法制备粗酶液,研究甘露聚糖酶作用的酶学特性.结果:从台湾海峡采集的海水和海泥样品中,分离得到细菌467株,霉菌145株,放线菌10株,初筛得到64株有透明圈的菌株,复筛得到菌株B555,其酶活力最高为28.18 U/mL,经鉴定为芽孢杆菌(Bacillts sp.).菌株B555所产甘露聚糖酶的最适反应pH为7.0,且在pH 5.0~10.0时较稳定;最适反应温度为50~55℃,在55℃时半衰期约为150 min;1 mmol/L的金属离子Ni+、Co2+、Zn2+、Mg2+、Ca2+、Na+、K+、Fe3+、Ba2对酶活力均有抑制作用.在55℃,pH 7.0条件下,该酶对槐豆胶和魔芋粉有很好的底物特异性,Km值分别为4.7和3.33 mg/mL,Vmax值分别为588.23和476.19 μmol/(mL·min).可应用于魔芋甘露低聚糖的酶法制备.
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中国食品学报
ISSN: 1009-7848
Year: 2015
Issue: 12
Volume: 15
Page: 66-73
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