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为实现新型CGTase在毕赤酵母中的高效表达,提取嗜热芽孢杆菌CHB1基因组DNA为模块,PCR扩增野生型基因CGT1,编码680个氨基酸.将该基因进行密码子优化CGT2,与野生型基因CGT1分别插入分泌型载体pPICZαA转化毕赤酵母GS115,获得两株酵母工程菌GS 115/pPICZαA-CGT1和GS 115/pPICZαA-CGT2;经甲醇诱导表达120 h后,CGT2活力达0.62U/mL,是优化前CGT1 (0.37 U/mL)活性的1.7倍;进一步对GS 115/pPICZαA-CGT2进行摇瓶发酵条件优化,确定其最优发酵条件为:pH 6.5、28℃、200 r/min、每24小时补加体积分数1.5％的甲醇诱导,120 h后其胞外酶活力达到1.26 U/mL,是优化前的两倍.
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食品与生物技术学报
ISSN： 1673-1689
CN： 32-1751/TS
Year： 2018
Issue： 9
Volume： 37
Page： 994-999
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