Stable　Nafion-Au　colloids　were　immobilized　on　a　glassy　carbon　electrode　(GCE)　for　detection　of　β-agonist　clenbuterol　by　electroanalysis.　The　Au　colloids　were　prepared　by　a　one-step　electrodeposition　onto　GCE,　with　obvious　electrocatalytic　activity　present.　The　negatively　charged　Nafion　film　was　an　efficient　barrier　to　negatively　charged　interfering　compounds,　resulting　in　accumulation　of　positively　charged　clenbuterol　at　the　Nafion　film.　The　electrochemical　characters　of　the　electrode　during　various　modified　steps　in　a　redox　probe　system　of　K4[Fe(CN)6]/K3[Fe(CN)　6]　were　confirmed　by　cyclic　voltammetry　(CV)　and　AC-impedance.　In　Britton-Robinson　(B-R)　buffer　solution　(pH　=　2.0)　and　the　potential　range　of　-0.2　to　1.2　V,　the　Nafion-Au　colloid　modified　electrode,　compared　to　a　bare　GCE,　exhibits　obvious　electrocatalytic　activity　towards　the　redox　of　clenbuterol　by　greatly　enhancing　the　peak　current　with　a　linear　calibration　curve　from　8.0　×　10-7　to　1.0　×　10-5　mol/L　and　a　detection　limit　of　(1.0　×　10-7　mol/L)　(R　=　0.996).　The　modified　electrode　shows　high　sensitivity,　selectivity　and　reproducibility.　The　recovery　for　detecting　clenbuterol　(∼10-6　mol/L)　in　human　serum　is　up　to　98.19%.　©　2010　Elsevier　Ltd.　All　rights　Reserved.